仪器工作原理 朗伯-比耳定律是各类分光光度法定量测定的基础,其物理意义为:当一束平行的单色光通过一均匀的、非散射的吸光物质溶液时,其吸光度与溶液层厚度和浓度的乘积成正比。其数学表达式为A=log(I0/I)=abc 式中A为吸光度;I0为入射光强度;I透射光强度;a为比例常数,它是与吸光物质性质、入射光波长及温度等因素有关,称为吸光系数;b为液层厚度,以cm为单位;c为以g·L-1为单位的质量浓度;则a以cm-1·g-1·L为单位;而A为量纲为一的量。如果c以mol·L-1为单位,此时的吸光系数称为摩尔吸光系数,用κ,它的单位为cm-1·mol-1·L。上式可改为A=κbc,κ为各种吸光物质在特定波长和溶济下的一个特征常数,数值等于在1㎝的溶液厚度为中吸光物质为1mol·L-1时的吸光度,它是吸光物质的吸光能力的量度。κ值越大,表示该吸光物质对某一波长的吸光能力越强,则方法的灵敏度越高。 UV-120-02紫外-可见分光光度计的基本组成部件: 光源→单色器→吸收池→检测系统→读数指示器 UV-120-02紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度计
1 比色室 2 100%T/0A钮 3 数字化读数显示器 4 0%T调零钮 5 曲线校正钮 6 测量选择钮 7 电源开关 8 钨灯开关 9 D2开关 10 灵敏度开关 11 波长选择钮 2操作说明1.打开电源2.打开钨灯电源3.用波长选择钮选择波长4.预热10分钟5.仪器调零:将测量档推到0-100%T,打开比色室盖子,用0%T调零钮调零。6.100%光通过调整:将测量选择钮推到ABS0-2,将比色杯装入标准曲线系列的空白溶液,盖上盖子,用100%T/0A钮调零。7.标准曲线测定:依次放入标准系列中各溶液进行吸收值A测定并绘制标准曲线。8.样品测定:将空白溶液放入,用100%T/0A钮调零,依次放入其它样品测定吸收值A,由标准曲线查得样品的浓度。
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