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原理 残余法是基于样品经溶剂反复抽提后，使全部脂肪除去，再从样品剩余的残渣量计算出粗脂肪含量。? 主要仪器? (1)索氏型脂肪抽提器。? (2)样品筛：20目、40目各一个。? (3)称样瓶：直径3.5cm，高7cm。? (4)培养皿：直径11—13cm。? (5)滤纸：中速或慢速。? (6)乳胶手套或白纱手套。? 其他仪器与试剂同上节4—5.1? 操作步骤? (1)样品的选取和制备：选取具有代表性的谷物或油料种子，拣出杂质，按四分法缩减取样。小粒种子如油菜、芝麻等取样量不得少于10g;大粒种子，如大豆、花生仁等取样量不得少于15g；谷物种子取样量不少于5g。? 将样品预先在80℃烘箱中干燥约2小时，以便制备样品。? 谷类、大豆、油沙豆经粉碎后，95%通过40目筛；油菜籽、胡麻籽、红花种子经粉碎后，95%通过20目筛；花生仁、蓖麻仁等用切片或小刀切成0.5mm以下薄片。芝麻用碾磨机或研钵细心磨碎，注意不要留有整粒，向日葵种子经剥壳后，子仁粉碎至均匀粉状。 样品处理完毕，立即混合均匀，装入磨口瓶中备用。? (2)将滤纸裁成7×7cm大小(谷类可增大些)，并叠成一端不封口的纸包(如图)，用铅笔编号码，顺序排列在培养皿中，每皿10—20包，然后将放好滤纸包的培养皿放入105℃±2℃烘箱中干燥2小时，取出放入干燥器中冷却至室温，分别将各包放入同一个称量瓶中称重(a)(注1)?? (3)用牛角勺将已制备好的样品小心地装入滤纸包中??(注2)?，谷物3—5g，油料1g左右，封上包口，并按原顺序号排列在培养皿中，放入105±2℃烘箱中，干燥3小时，然后放入干燥器中冷却至室温，分别将各包在原称量瓶中称量(b)，两次称重之差即为试样残渣重(注3)?。? (4)抽提：将样品包有顺序地装入抽提筒中，抽筒内最多放40包。倒入无水之醚??(注4)?，使超过样品高度，连接好抽提器各部分，先浸泡一夜。次日，将浸泡后的乙醚放入抽提瓶中，并在提提瓶中放入几粒玻璃或浮石，然后重新倒入无水乙醚入抽提筒，使其完全浸泡样品，连接好抽提器的各部分，接通冷凝水，水浴锅加温进行抽提，调节水浴温度使其冷凝下滴至乙醚呈连珠状(乙醚回流量可为每分钟20ml)，水浴温度可在55℃以下。一般如此须抽提6—8小时，抽提时的室温以15—25℃为宜，不同油料种子抽提时间见附表。抽提完毕，放出抽提筒中的乙醚，取出样包，放在毒气厨内通风凉干，使乙醚挥发。? 附表 不同油料种子的提提时间 | | | | 谷物、大豆、油沙豆 蓖麻、油菜、红花、芝麻、花生、向日葵、胡麻 | | |
(注：〖WB〗平行测定的结果用算术平均值表示，保留小数点后二位数字。? 平等测定结果的相对相差，谷物不得高于5%，大豆不得高于2%，油料不得高于1.5%。)? (5)将样品按原顺序排列在培养皿中，放入105℃±2°烘箱中干燥3小时，取出放入干燥器冷却至室温，再将各包在原称量瓶中称重(C)，这次称重与第二次称重之差即为粗脂肪重。? 结果计算?粗脂肪(干基)= ()b-c[]b-a[SX]]×100? a— 为称量瓶+滤纸重(g)；? b— 为称量瓶+滤纸重+烘干样重(g)；? c— 为称量瓶+滤纸重+抽提后残渣重(g)；? 注释? (注1)全部操作过程须戴乳胶手套或白纱手套，称量瓶要用纱或绸布擦净内外的灰尘及纤维等，并须经常校正重量，使其重量误差限制在0?001g之内。? (注2)油重法也可用滤纸包代替滤纸筒。? (3)称量时，室内相对湿度应在70%以下，每个干燥器内只装一盘样品。 (注4)乙醚在空气中易吸氧并形成过氧化物，它很不稳定，可因受热(如乙醚蒸馏或蒸发时)震动而发生爆炸，故使用乙醚须十分小心注意：? ①切不可明火加热，不得接近任何火源，实验室保持良好通风。? ②使用之前，应检查乙醚中过氧化物是否存在，若有应除去。?③乙醚应装在棕色瓶中，尽量装满。? 附：关于使用乙醚的注意事项? 1.乙醚中过氧化物的检查：用碘化钾法试验乙醚中过氧化物，可将10ml乙醚装入具塞的无色玻璃量筒中，加1ml新配制的10%KI溶液，在没有直射阳光下，对着白色背景从横断方向观察，两层均应无色。? 另取9ml乙醚加入1ml饱和KI溶液，振摇，如醚层出现黄色，则其中含有0?0005%的过氧化物，则应经处理才能使用。? 2?乙醚中过氧化物阻化、抑制与除去。?贮存乙醚时，可加入阻化剂以阻止其氧化，如使乙醚与活性碳或活性氧化铝保持接触，可以防止贮存中的乙醚发生爆炸；或在100ml乙醚中加0.0001g苯三酚，可阻止过氧化物的形成达两年之久。? 除去过氧化物可将500ml乙醚放入1L分液漏斗中，加入15ml20%硫酸亚铁铵溶液，5ml1:1硫酸，8ml蒸馏水，振动数分钟，分层后弃去水，相同法再洗1—2次，直至过氧化物除尽为止，最后用蒸馏水每次100ml洗涤两次，将洗好的乙醚放至带磨口塞的棕色瓶中，加无水氯化钙过夜，次日蒸馏收集馏出液。 除去乙醚中过氧化物试剂，常用的还有硫酸亚铁、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、氯化亚锡、锌与酸、钠与醇、铜与锌，高锰酸钾，氢氧化银和二氧化铅等。? (附加装置图，滤纸折叠方法 索氏脂肪抽提器 残余法滤纸包折叠方法 a.烧瓶 b.浸提器 c.冷凝器 | 
发表于 2012-4-19 11:53:29
